Quando um analito previamente injetado aparece como pico no cromatograma das amostras subsequentes, é possível observar excedentes em sistemas cromatográficos.
Os excedentes tendem a ocorrer quando uma pequena quantidade de analito permanece no sistema após a amostra ser injetada. É possível medir o excedente observando os picos dos analitos que aparecem ao executar uma amostra em branco imediatamente após uma amostra analítica.
A Waters especifica que o excedente de amostra do Alliance iS System seja de, no máximo, 0,002%.
Uma causa comum de excedentes é a lavagem inadequada do sistema, especificamente da agulha de amostra. A escolha de um solvente de lavagem adequado pode minimizar os excedentes para uma análise específica (consulte Diretrizes para solventes de purga e lavagem). O solvente de lavagem deve ser forte o suficiente para dissolver qualquer amostra remanescente na agulha, e a duração da lavagem deve ser longa o suficiente para remover os resíduos do sistema.
As condições do método também afetam o excedente. Um tempo de espera muito breve nas condições finais de um gradiente, especialmente se o gradiente for acentuado, pode não remover todos os analitos do sistema ou da coluna. É importante lavar completamente o sistema e reequilibrar a coluna antes de prosseguir com uma análise subsequente.
Ao tentar minimizar o excedente, a hidrofobicidade e solubilidade das amostras, bem como a limpeza durante a preparação das amostras são fatores adicionais a serem considerados, assim como a contaminação por ferramentas de preparação de amostra.
Dica:
- Teste a amostra no solvente de lavagem para garantir que ele não faça com que o analito ou a matriz precipitem.
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Diretrizes gerais
